掌控生物制造产业的核心芯片

　　催化剂是化学反应的“魔术棒”，按照人的需求，改变反应物的反应速率，却不改变化学式两边的平衡，90%以上的工业过程均使用催化剂。但催化剂就一定是化学催化剂吗？大势所趋的绿色化学需要更为绿色的反应过程。

　　华东理工大学许建和教授项目团队就瞄准“生物催化剂”在医药研发领域的独特优势，深耕十六载，助推相关产业绿色转型升级，建立酶法合成万能抗氧化剂“（R）－硫辛酸”的成套工艺，并在全球率先实现产业化。这一“生物催化剂的快速定制改造及高效合成手性化学品的关键技术”项目，获得2018年上海市技术发明奖一等奖。

　　基因搜索千里挑一选“尖兵”

　　神奇的（R）－硫辛酸，是一种类似维他命的万能抗氧化剂，在预防和治疗心脏病、糖尿病及老年痴呆症方面有广泛应用。但其生产的关键中间体“手性氯醇”，化学合成条件苛刻，安全和环保压力巨大。能不能变“化学催化为主”为“生物催化为主”？

　　事实上，设计并创制高效、专一、绿色的生物催化剂和催化工艺，已成为国际上高端手性化学品合成技术发展的普遍趋势。经过慎重思考，许建和团队选择（R）－硫辛酸等手性醇工业生产所需的羰基还原酶催化剂作为主攻方向。早在上世纪90年代中期就前瞻性地组建起国内最早的生物催化研究室。“生物催化是化学催化的有益补充和手性合成的重要手段，具有反应条件温和、立体选择性强等独特优势。”

　　作为微生物，天然酶的基因数量特别巨大。高效、稳定的工业用生物催化酶的筛选，犹如大海捞针。能否把天生脆弱的酶分子改造成工业上稳定耐用的催化剂，更关系到生物催化能否实现产业化应用的关键。为了从多达375万条基因的数据库中快速筛选出工业上有用的羰基还原酶，项目团队通过梳理归纳基因的“进化树”，科学规划、聚类约简，从每3000条相似基因中挑选1名代表，经过常规的分子克隆和发酵技术，制备出可代表300多万条功能未知基因的1214个先导酶，使目标酶基因的搜索空间一下子缩小3个数量级。

　　“精心挑选并培养出来的先导酶分子，就像潜伏在基因‘林海’中的‘尖兵’，一旦与待测试的目标底物接通信号，即可引导基因搜索引擎，瞄准‘进化树’上活性先导酶邻近的基因群落，再通过高通量筛选方法，快速定制并获得具有特需工业属性的羰基还原酶。”许建和说。

　　持续深耕解“卡脖子”难题

　　经过前期的顶层设计和批量定制，项目团队逐步建立产权自主、代表性强、品种逾千的生物催化先导酶“尖兵团”。对于制药工业不同结构的羰基底物，满足了它们不对称生物还原的多样化需求，显著提升了我国从头设计和定制工业酶的自主创新能力。

　　“从无到有”只是第一步，更进一步则是“从有到优”。在此基础上，项目团队针对天然酶活力低、稳定性差等应用瓶颈问题，解析了酶的晶体结构和催化机理，在2018年诺贝尔奖化学奖相关技术的基础上，创新发展多目标并行的定向进化策略（MODE），成功将天然羰基还原酶的催化效率提高960倍，稳定性提高1940倍，得到高性能的（R）－硫辛酸合成酶催化剂。

　　生物催化酶“尖兵团”高效稳定，解决了长期困扰工业界的酶催化剂效率低、选择性差等技术难题，将开发周期由原来的1到2年，大幅度缩短至1到2周，极大提高了目标生物催化剂从头设计开发的针对性和命中率。“酶是生物制造产业的核心‘芯片’，而智能化是未来发展新趋势，这些都是技术创新和知识产权争夺的焦点。”许建和表示，团队将结合智能计算方法，持续深耕解“卡脖子”难题，更好满足医药化工行业安全、节能等技术转型升级的深层次需求。

　　深度参与科技成果产业化

　　随着项目团队在羰基还原酶催化领域不断取得丰富成果，苏州富士莱制药公司、江西科苑生物药业有限公司、厦门欧米克生物科技有限公司等多家企业慕名而来，希望获得生产革新方面的技术支持，解决传统生产中存在的不安全、不环保、成本高、纯度低等难题，开拓全新的绿色生产工艺。

　　项目团队跨前一步，深度参与科技成果产业化进程。“大型反应器中局部的过酸或过碱现象，容易造成酶的工艺性失活。”许建和解释，项目团队改用对酶友好的弱碱，替代容易使酶失活的强碱，大幅减缓酶的失活，并设计制作酶反应专用的碱液喷雾均布装置，显著降低反应器中酸和碱的浓度级差，攻克长期悬而未决的酶工艺性失活问题。项目团队还针对反应底物在水相中不稳定、频繁更换工作介质造成大量浪费和排污等情况，在酶促还原反应中引入后续步骤通用的溶剂，形成“甲苯-水”两相酶催化介质体系，有效抑制底物酮酯的自发水解，建立基于羰基酶法还原的（R）－硫辛酸绿色制造成套工艺。

　　值得一提的是，合作企业苏州富士莱制药有限公司由此果断淘汰原来使用的6步全化学合成工艺，在全球范围内率先建立既高效又环保的“酶-化学偶联法”合成技术，工艺路线从6步缩短为3步，产品总收率从25%提高至55%，大幅度降低能耗和三废排放。

　　十余年来，该项目获中国发明专利授权26项，申请美国专利1项、PCT专利1项；发表相关SCI论文45篇，被他人引用530次；近3年为企业新增产值9.8亿元，新增利润2.4亿元，并培育了1家上市企业；还累计培养博士和硕士研究生100余人，其中4人已成为高校教授。