科技日报世界首例人类永久性新生儿糖尿病犬模型问世

　　2日，记者从中国科学院广州生物医药与健康研究院（以下简称广州生物院）获悉，该院与北京希诺谷生物科技有限公司合作，利用单碱基编辑器对葡萄糖激酶进行点突变，成功培育出世界首例人类永久性新生儿糖尿病犬模型。相关研究近日在线发表于《细胞发现》。广州生物院研究员赖良学与北京希诺谷生物有限公司董事长米继为该论文共同通讯作者，王晓民、梁艳慧和赵建平为共同第一作者。

　　糖尿病是继心血管疾病及***后的第三大疾病。目前，全世界糖尿病患者超过4亿，中国糖尿病患者已超过1亿。其中，部分病例发生于新生儿时期，是由与分泌胰岛素的β细胞功能相关的基因突变导致的遗传性糖尿病。

　　“葡萄糖激酶（GCK）是葡萄糖代谢过程中的第一个限速酶，也是葡萄糖浓度感受器，在调节血液葡萄糖浓度中起着关键作用。”相关研究人员表示，GCK基因突变在青少年糖尿病中所占比例较大，且大多数为单核苷酸突变，纯合或复合型的杂合突变会导致GCK蛋白完全失活，患者表现出永久性新生儿糖尿病，临床症状包括出生第一天开始高血糖、伴随有生长缓慢、患者终身需要注射外源胰岛素才能够存活。

　　研究人员首次尝试利用单碱基编辑器对犬GCK基因进行点突变，使GCK基因上的CAG密码子完成C到T的转变，从而引入终止密码子，提前终止GCK的翻译，使GCK蛋白完全失去活性。其过程是首先从供体犬获取受精卵，借助显微操作系统将体外转录的碱基编辑器mRNA和sgRNA注射到受精卵中，然后将完成注射的受精卵移植入代孕犬的输卵管内，使其在体内继续发育成熟并分娩。

　　本实验总共移植56枚受精卵，产下17只幼犬，共获得4只GCK基因编辑犬，其中3只为纯合突变，1只为嵌合体。GCK基因点突变小狗刚出生就表现出高血糖症状，且生长缓慢，如果不注射外源胰岛素，新生犬将在两周内死亡，如果出生后第一天就开始注射胰岛素，新生犬的血糖浓度趋于正常水平，可以长期存活，同时体重与没有治疗的幼犬相比也得到很大程度的恢复。

　　研究人员对RNA测序结果进行GO富集分析发现，注射外源胰岛素的永久性新生儿糖尿病模型犬能促进脂类和脂肪酸等代谢，使犬的生理指标维持在一个相对正常的水平，从而能使其存活时间延长，这些特征都与人类永久性新生儿糖尿病症状一致。

　　“获取能够准确模拟人类该疾病的动物模型对疾病的发生机制研究和开发新的治疗手段具有重大意义。犬是一种杂食性动物，在代谢、生理、生活习性和解剖特征等方面与人类非常接近，因此是研究人类糖尿病的理想动物模型。”赖良学说。据悉，该单碱基基因编辑犬将为研究人类新生儿糖尿病的发生机制和开发新的治疗方法，如药物治疗、干细胞治疗和基因治疗等提供理想的动物模型。

　　（记者叶青 通讯员黄博纯）

　　（科技日报   2021.11.3   03版）